Jump to content
coder

Liczenie drożdży

Recommended Posts

Może jak sobie ładnie opiszę procedurę liczenia drożdzy, to się wreszcie za to zabiorę:

 

1. Przygotowanie roztworu drożdzy - gęstwę trzeba rozcieńczyć zwykle 1:1000, żeby nie było za dużo drożdzy w polu mikroskopu.

 

- przygotowyjemy 3 sterylne probówki, w każdej po 9 ml wody. Oznaczamy je 10, 100, 1000.

- do pierwszej przenosimy pipetą 1ml gęstwy, mieszamy. To jest 1:10

- do drugiej przenosimy pipetą 1ml z pierwszej probówki, mieszamy. To jest 1:100

- do trzeciej przenosimy pipetą 1ml z drugiej probówki, mieszamy. To jest 1:1000

 

2. Przygotowujemy błękit metylowy do barwienia martwych komórek:

- odważamy 0.1 grama błękitu i dodajemy wody destylowanej do objętości 100 ml, dostajemy roztwór 0.1%

- przed liczeniem mieszamy 1ml drożdży rozcieńczonych 1:1000 z 1ml roztworu. Ale to chyba nam zwiększy rozcieńczenie do 1:2000 ?

- czekamy 2 minuty - martwe drożdże zabarwią się na ciemnoniebiesko, żywe na jasnoniebiesko

 

3. Liczymy

Potrzebujemy mikroskop 1 do 400, i hemacytometr.

- mieszamy próbkę porządnie

- napełniamy hemacytometr pipetą

- pod mikroskopem widać siatkę 5 na 5 kwadratów, liczymy tylko w 5 kwadratach: 4 narożnych i środkowym. Notujemy też ilość martwych komórek. Nie liczymy komórek przecinających górną i lewą krawędź kwadratu.

 

wzrór na wyliczenie:

Drożdży na ml jest = ilość policzonych komórek * 5 * stopień rozcieńczenia ( zwykle 1000) * 10000

 

Jezeli drożdże nie rozłożyły się równomiernie, liczymy we wszystkich 25 kwadratach, i wtedy nie mnożmy przez 5.

 

żywotność oceniamy jako % = (wszystkie - martwe)/ wszystkie * 100 %

 

Proste? Proste. Do roboty.

Share this post


Link to post
Share on other sites

http://www.pg.gda.pl/chem/Katedry/Leki_Biochemia/dydaktyka/biologia_komorki/zajecia_wstepne.pdf

http://www.pg.gda.pl/chem/Katedry/Leki_Biochemia/dydaktyka/biofizyka/cz7.pdf

Liczenie komórek i oznaczenie żywotności należy wykonać oddzielnie. To drugie można zrobić na zwykłym szkiełku przedmiotowym i policzyć komórki w polu widzenia.

Share this post


Link to post
Share on other sites

Join the conversation

You can post now and register later. If you have an account, sign in now to post with your account.

Guest
Reply to this topic...

×   Pasted as rich text.   Paste as plain text instead

  Only 75 emoji are allowed.

×   Your link has been automatically embedded.   Display as a link instead

×   Your previous content has been restored.   Clear editor

×   You cannot paste images directly. Upload or insert images from URL.


×
×
  • Create New...

Important Information

We have placed cookies on your device to help make this website better. You can adjust your cookie settings, otherwise we'll assume you're okay to continue.